Hamilton漢密爾頓哈美頓PRP-3/300液相色譜柱蛋白質和肽純化分離分析半制備保護柱

▲Hamilton PRP-3/PRP-300色譜柱的詳細描述：

1．   pH值在1~13范圍內穩定。

2．   比硅膠基色譜柱有更好的樣品采收效果（沒有硅烷醇基團）

3．   優良的耐溶劑性能（載體能用強堿清洗以去除剩余的殘渣）

4．   2種粒徑： 10和12~22μm

5．   8種柱子內徑：1~50.8 ㎜

6．   2種柱材料：316不銹鋼和PEEK

7．   分析柱和半制備/制備保護柱

Hamilton PRP-3/PRP-300色譜柱是聚合物基質反相高效液相色譜柱，用于蛋白質和肽的純化和分離，具有優秀的回收率(> 90%)。它是基于PRP-1的基礎上采用了300孔徑，而PRP-1采用的是100?的孔 徑。PRP-3色譜柱采用300孔徑，不會導致不可逆的蛋白質吸附，提高了蛋白質回收率。 高穩定性的聚合物填料（苯乙烯 - 二乙烯基苯）因為不含硅烷醇基，不會導致不可逆的蛋白質吸附，從而提高了蛋白質的回收率。

以PS-DVB為載體，耐壓5,000psi，在流動相發生改變的情況下載體也不會出現收縮或溶脹現象。與小分子化合物不同，大部分的蛋白質內部為疏水性，外側帶高電荷，特 別是當pH值接近蛋白質的等電點時，經常會出現溶解問題。性能穩定，使用者在蛋白組學研究中可以選擇更廣泛的溶劑，如濃酸、腐蝕性的變性劑和清洗液等。

▲Hamilton PRP-3/PRP-300色譜柱固定相結構和應用：

應用：

有機化合物：大分子（> 2,000mw）、肽、蛋白質、蛋白質水解物、 保護和去保護的寡核苷酸、核酸。

▲Hamilton PRP-3/PRP-300色譜柱的訂購信息：

外形尺寸  粒徑 貨號

10 μm 12–20 μm

2.1 x 150mm 79392

4.1 x 150mm 79466

4.6 x 150mm PEEK 79382

4.6 x 250mm PEEK 79574

7.0 x 305mm 79468

10 x 250mm 79526

21.2 x 250mm 79147

21.2 x 100mm 79186

21.2 x 250mm 79469

散裝樹脂（1 g）79701 79702

孔徑：300

材料：PS-DVB

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在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質，他們的類型結構、極性、酸堿性、分子量大小等等。

1.樣品是極性的且弱酸性的；就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱

2. 如果樣品極性太強，或酸性太強；可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC（親水色譜），也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱（缺點是離子對試劑平衡時間長，對流動相pH要求比較精密，否 則很難重復實驗，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗）

3. 若樣品是堿性的；可選擇高純硅膠柱（高純硅膠缺少金屬雜質，且硅膠端基封尾）或一些經過修飾的C18柱（如極性嵌入技術或堿去活技術等），他們都會減少堿性化合物的拖尾，一般會選擇中性或偏堿的條件下做，因為這樣可增加堿性樣品的保留

4.如果堿性化合物的極性太強，或堿性太強；可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測（優點是方法開發簡單，缺點是目前實 現這一技術的色譜柱品牌比較少，價格也高）或者選用HILIC色譜柱（硅膠柱在反相條件下使用，這也是很經典的檢測堿性樣品的方法）選擇強離子交換柱（缺點 是不能用來分析其它樣品，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復實驗）也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱.